酒精中毒、肝功能損害者慎用。嬰兒、3 個月以上孕婦和哺乳期婦女慎用。
對診斷的干擾：可引起直接抗球蛋白試驗 (Coombs 試驗) 陽性；干擾血清葉酸濃度測定和血清維生素 B12 濃度測定結果；可使磺溴酞鈉試驗滯留出現假陽性；可干擾利用分光光度計或顏色改變而進行的各項尿液分析試驗的結果；可使血液尿素氮、血清堿性磷酸酶、血清丙氨酸氨基轉移酶、門冬氨酸氨基轉移酶、血清膽紅素及血清尿酸濃度測定結果增高。
利福平可致肝功能不全, 在原有肝病患者或本品與其他肝毒性藥物同服時有伴發黃疸死亡病例的報道, 所以原有肝病患者, 僅在有明確指征情況下方可慎用，治療開始前、治療中嚴密觀察肝功能變化，肝損害一旦出現，馬上停藥。
高膽紅素血癥 系肝細胞性和膽汁潴留的混合型，輕癥患者用藥中自行消退，重者需停藥觀察。血膽紅素升高也可能是利福平與膽紅素競爭排泄的結果。治療初期 2～3 個月應嚴密監測肝功能變化。
單用利福平治療結核病或其他細菌性感染時病原菌可迅速產生耐藥性，因此本品必須與其他藥物合用。治療可能需持續 6 個月～2 年，甚至數年。
利福平可能引起白細胞和血小板減少，并導致齒齦出血和感染、傷口愈合延遲等。此時應避免拔牙等手術、并注意口腔衛生、刷牙及剔牙均需慎重，直至血象恢復正常。用藥期間應定期檢查周圍血象。
利福平應于餐前 l 小時或餐后 2 小時服用，清晨空腹一次服用吸收最好，因進食影響本品吸收。
肝功能減退的患者常需減少劑量，每日劑量 ≤ 8 mg/kg。
腎功能減退者不需減量。在腎小球濾過率減低或無尿患者中利福平的血藥濃度無顯著改變。
服藥后尿、唾液、汗液等排泄物均可顯桔紅色。間質性腎炎的可能。

1. 飲酒可致利福平性肝毒性發生率增加，并增加利福平的代謝，需調整利福平劑量，并密切觀察患者有無肝毒性出現。
2. 對氨基水楊酸鹽可影響本品的吸收，導致其血藥濃度減低；如必須聯合應用時，兩者服用間隔至少6小時。
3. 本品與異煙肼合用肝毒性發生危險增加，尤其是原有肝功能損害者和異煙肼快乙酰化患者。
4. 利福平與乙硫異煙胺合用可加重其不良反應。
5. 氯苯酚嗪可減少利福平的吸收，達峰時間延遲且半衰期延長。
6. 利福平與咪康唑或酮康唑合用，可使后兩者血藥濃度減低，故本品不宜與咪唑類合用。
7. 腎上腺皮質激素(糖皮質激素、鹽皮質激素)、抗凝藥、氨茶堿、茶堿、氯霉素、氯貝丁酯、環胞素、維拉帕米(異搏定)、妥卡尼、普羅帕酮、甲氧芐啶、香豆素或茚滿二酮衍生物、口服降血糖藥、促皮質素、氨苯砜、洋地黃苷類、丙吡胺、奎尼丁等與利福平合用時，由于后者誘導肝微粒體酶活性，可使上述藥物的藥效減弱，因此除地高辛和氨苯砜外，在用利福平前和療程中上述藥物需調整劑量。本品與香豆素或茚滿二酮類合用時應每日或定期測定凝血酶原時間，據以調整劑量。
8. 本品可促進雌激素的代謝或減少其腸肝循環，降低口服避孕藥的作用，導致月經不規則，月經間期出血和計劃外妊娠。所以，患者服用利福平時，應改用其他避孕方法。
9. 本品可誘導肝微粒體酶，增加抗腫瘤藥達卡巴嗪(dacarbazine)、環磷酰胺的代謝，形成烷化代謝物，促使白細胞減低，因此需調整劑量。
10. 本品與地西泮(安定)合用可增加后者的消除，使其血藥濃度減低，故需調整劑量。
11. 本品可增加苯妥因在肝臟中的代謝，故兩者合用時應測定苯妥因血藥濃度并調整用量。
12. 本品可增加左旋甲狀腺素在肝臟中的降解，因此兩者合用時左旋甲狀腺素劑量應增加。
13. 本品亦可增加美沙酮、美西律在肝臟中的代謝，引起美沙酮撤藥癥狀和美西律血藥濃度減低，故合用時后兩者需調整劑量。
14. 丙磺舒可與本品競爭被肝細胞的攝入，使本品血藥濃度增高并產生毒性反應。但該作用不穩定，故通常不宜加用丙磺舒以增高本品的血藥濃度。

利福/平口服吸收良好，服藥后 1.5～4 小時血藥濃度達峰值。成人一次口服 600 mg 后血藥峰濃度 (Cmax) 為 7～9 mg/L，6 個月至 5 歲`小兒一次口服 10 mg/kg，血藥峰濃度 (Cmax) 為 11 mg/L。本品在大部分組織和體液中分布良好，包括腦脊液，當腦膜有炎癥時腦脊液內藥物濃度增加；在唾液中亦可達有效治療濃度；本品可穿過胎盤。表觀分布容積 (Vd) 為 1.6L／kg。蛋白結合率為 80％～91％。進食后服藥可使藥物的吸收減少 30％，該藥的血消除半衰^期 (t1/2β) 為 3～5 小時，多次給藥后有所縮短，為 2～3 小時。
本品在肝臟中可被自身誘導微粒體氧化酶的作用而迅速去乙酰化，成為具有抗菌活性的代謝物去乙酰利福平，水解后形成無活性的代謝物由尿排出。
本品主要經膽和腸道排泄，可進入腸肝循環，但其去乙酰活性代謝物則無腸肝循環。60％～65％的給藥量經糞便排出，6％～15％ 的藥物以原形、15％ 為活性代謝物經尿排出，7％ 則以無活性的 3-甲酰衍生物排出。亦可經乳汁排出。腎功能減退的患者中本品無積聚；由于自身誘導肝微粒體氧化酶的作用，在服用利福平的 6～10 天后其排泄率增加；用高劑量后由于膽道排泄達到飽和，本品的排泄可能延緩。
利福平不能經血液透析或腹膜透析清除。